氣溶膠噴霧滅菌性能測(cè)試艙是針對(duì)消毒劑或消毒器械使用噴霧消毒后，對(duì)空氣中的氣溶膠噴霧的消毒效果進(jìn)行開(kāi)發(fā)研究，從而建立企業(yè)的檢測(cè)方法。下面我們通過(guò)六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣法進(jìn)行試驗(yàn)，建立空氣噴霧消毒效果試驗(yàn)的檢驗(yàn)方法。

試驗(yàn)設(shè)備：環(huán)儀儀器 20m3氣溶膠噴霧滅菌性能測(cè)試艙；過(guò)氧化氫消毒機(jī)

試驗(yàn)材料：15% 過(guò)氧化氫消毒液、白色葡萄球菌 8032、磷酸鹽緩沖液、中和劑溶液等

試驗(yàn)儀器：生物安全柜、氣溶膠發(fā)生器、六級(jí)篩孔撞擊式采樣器等

試驗(yàn)步驟：

（1）打開(kāi)兩個(gè) 20 m3測(cè)試艙的開(kāi)關(guān)，然后設(shè)置兩個(gè) 20m3測(cè)試艙的溫度和相對(duì)濕度，其溫度為 22.5 ℃、相對(duì)濕度為 60%，然后觀察一定時(shí)間，待溫濕度恒定在所調(diào)數(shù)值左右再進(jìn)行下一步；

（2）將已加好 15% 過(guò)氧化氫消毒液的過(guò)氧化氫消毒機(jī)、已加好菌懸液的氣溶膠發(fā)生器等全部放入測(cè)試艙內(nèi)，并連接好電源，然后將測(cè)試艙的門(mén)關(guān)閉；

（3）打開(kāi)氣溶膠發(fā)生器開(kāi)關(guān)，進(jìn)行噴霧染菌，同時(shí)打開(kāi)風(fēng)扇開(kāi)關(guān)，用風(fēng)扇進(jìn)行攪拌。噴霧染菌結(jié)束后，關(guān)閉氣溶膠發(fā)生器，風(fēng)扇繼續(xù)攪拌 5 min，最后需要靜置 5 min，確保細(xì)菌均勻分布于空氣中。

將兩個(gè)氣霧艙分別標(biāo)記為對(duì)照組和試驗(yàn)組空氣艙，然后用已連接好的六級(jí)篩孔撞擊式采樣器（里面裝有NA平板）分別對(duì)兩個(gè)氣霧室進(jìn)行采樣。

將采樣氣體管的進(jìn)氣口放在艙中央離地 1 米高處，然后采樣口連接六級(jí)篩孔空氣撞擊式采樣器（裝有 NA 瓊脂平板），按照采樣速度 28. 3 L/min，采樣時(shí)間 0. 5 min 進(jìn)行采樣，分別為消毒處理前對(duì)照組和試驗(yàn)組的陽(yáng)性對(duì)照（即污染菌量），應(yīng)在 5.0×10^4~5.0×10^6 CFU/m3之間；

（4）用遙控器打開(kāi)過(guò)氧化氫消毒機(jī)，點(diǎn)擊“開(kāi)始”按鈕，讓設(shè)備按照 2 mL/m3 進(jìn)行噴霧15% 過(guò)氧化氫消毒液，在試驗(yàn)空氣艙內(nèi)進(jìn)行消毒，對(duì)照組空氣艙同時(shí)進(jìn)行相應(yīng)處理，即將 15% 過(guò)氧化氫消毒液更換為無(wú)菌水，進(jìn)行相同的操作；

（5）噴霧結(jié)束后，作用 2 h，用已連接好的六級(jí)篩孔撞擊式采樣器 （里面裝有含中和劑的 NA 平板） 分別對(duì)兩個(gè)氣霧室進(jìn)行采樣，采樣速度為 28. 3 L/min，采樣時(shí)間 5 min，對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照空氣艙同時(shí)進(jìn)行采樣；

（6）采樣結(jié)束后，將所有的平板直接放入（36±1℃）恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48 h，然后觀察結(jié)果，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)；

（7）同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照組，即用同批次未用的培養(yǎng)基等同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。陰性對(duì)照組應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，否則試驗(yàn)失敗，需更換試劑重新進(jìn)行試驗(yàn)；

（8）試驗(yàn)重復(fù) 3 次。

試驗(yàn)結(jié)果：

≥200 mg/L 的硫代硫酸鈉的普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基對(duì)白色葡萄球菌有明顯的抑制作用，而在其中添加≥50%D/E中和肉湯后，其抑制作用消失，但只有當(dāng)其中添加≥2 倍濃度D/E 中和肉湯后，中和劑鑒定試驗(yàn)結(jié)果才滿足評(píng)價(jià)規(guī)定，第 1組~第 3 組菌量在 50 CFU/平板~300 CFU/平板之間，三組間菌落數(shù)誤差率不超過(guò) 15%，第 4 組無(wú)菌生長(zhǎng)，且連續(xù) 3 次試驗(yàn)合格。

如有試驗(yàn)疑問(wèn)，可以咨詢(xún)環(huán)儀儀器相關(guān)技術(shù)人員。